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無(wú)肌間刺魚(yú)突變體種質(zhì)的創(chuàng )制是近年來(lái)魚(yú)類(lèi)遺傳育種學(xué)研究的熱點(diǎn)。異育銀鯽以其肉質(zhì)細嫩鮮美深受消費者青睞,但其體內具有的80多根細小的肌間刺給食用者帶來(lái)了不少麻煩。近兩年來(lái),中國科學(xué)院水生生物研究所桂建芳院士團隊經(jīng)全基因組解析揭示銀鯽為雙三倍體,即包含有兩套三倍體基因組并由此開(kāi)拓完善了在雙三倍體銀鯽和雙二倍體金魚(yú)中通過(guò)基因編輯快速創(chuàng )制關(guān)鍵基因突變體的方法。
基于這些突破,桂建芳院士團隊創(chuàng )建了多倍體魚(yú)類(lèi)精準育種技術(shù),并與已在斑馬魚(yú)中鑒定出runx2b為肌間刺主效基因的華中農業(yè)大學(xué)高澤霞教授合作,經(jīng)一年多的努力,在雙三倍體銀鯽中創(chuàng )制出無(wú)肌間刺突變體的新種質(zhì)。近日,相關(guān)研究成果以“Creation of intermuscular bone-free mutants in amphitriploid gibel carp by editing two duplicated runx2b homeologs”為題在線(xiàn)發(fā)表于Aquaculture。
研究人員首先發(fā)現雙三倍體銀鯽runx2b具有兩個(gè)部分同源基因(Cgrunx2b-A和Cgrunx2b-B),且每個(gè)部分同源基因具有3個(gè)序列高度一致的等位基因。接著(zhù)追蹤了肌間刺的骨化過(guò)程,發(fā)現肌間刺在孵化后14天左右開(kāi)始從魚(yú)體的尾部朝頭部骨化,發(fā)現單獨敲除CgRunx2b-A或CgRunx2b-B不影響銀鯽肌間刺發(fā)育,但同時(shí)敲除CgRunx2b-A和CgRunx2b-B的所有等位基因會(huì )導致肌間刺完全缺失。通過(guò)上述的研究,已獲得291尾完全缺失肌間刺的銀鯽突變體。
該研究揭示了CgRunx2b-A和CgRunx2b-B協(xié)同調節銀鯽肌間刺發(fā)育。重要的是,創(chuàng )制的銀鯽無(wú)肌間刺突變體和少肌間刺突變體(圖1)為培育無(wú)肌間刺異育銀鯽新品系奠定了基礎。下一步,研究人員將通過(guò)雌核生殖建立銀鯽無(wú)肌間刺克隆系,并在相同飼養條件下,與異育銀鯽主養品種進(jìn)行生長(cháng)等經(jīng)濟性狀評價(jià)。
水生所甘瑞海博士為該論文的第一作者,桂建芳院士和周莉研究員以及華中農業(yè)大學(xué)高澤霞教授為共同通訊作者。該研究得到中國科學(xué)院戰略性先導科技專(zhuān)項(XDA024030104)、國家重點(diǎn)研發(fā)計劃項目(2018YFD0901202)、湖北洪山實(shí)驗室(2021hszd001)、中科院特別研究助理資助項目等項目的支持。
論文鏈接: https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2023.739300
圖1. 銀鯽Cgrunx2b-A和Cgrunx2b-B突變體的肌間刺表型和基因型